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為什么HPLC流動(dòng)相溶劑要過濾和脫氣?

? ? ? ? 要回答這個(gè)問題,首先來了解一下什么叫流動(dòng)相。簡而言之,流動(dòng)相就是載體,將物質(zhì)帶到固定相里并通過固定相的流體。流動(dòng)相可以是緩沖液與有機(jī)溶劑結(jié)合的水-有機(jī)混合物,也可以是有機(jī)-有機(jī)混合物。

? ? ? ? ?開始使用流動(dòng)相溶劑進(jìn) 行色譜分析前,一定要檢查溶劑是否完全混溶,這是非常重要的,其次是要關(guān)注它們在混合時(shí)是否會相互反應(yīng),如果發(fā)生化學(xué)反應(yīng),會影響流動(dòng)相的使用和色譜的正確分析。

?未標(biāo)題-5

? ? ? ? 有些色譜工作者可能會說,那我采用HPLC級溶劑可以直接使用嗎?恒譜生建議,即使是HPLC級溶劑也要在使用前進(jìn)行過濾!為什么呢?主要是有些懸浮顆?;螂s質(zhì)是細(xì)微米的,人的肉眼是無法觀測到的,我們不能判斷一個(gè)清澈的溶劑就一定“完全干凈”。就好比我們使用自來水,也看著很干凈是不是?但是其實(shí)里面包含很多其它的不溶物質(zhì)等。如果你在進(jìn)行色譜分析時(shí)不將懸浮顆粒和雜質(zhì)去除,會影響HPLC系統(tǒng)的性能。不僅如此,因?yàn)樯V柱是多孔結(jié)構(gòu),顆粒物很可能將色譜柱堵塞,背壓升高,影響流速甚至損壞泵,因?yàn)橐粫r(shí)的圖方便而造成了色譜柱損壞就得不償失了。

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? ? ? ? 說完了過濾,現(xiàn)在又來說脫氣。我們都知道液相色譜系統(tǒng)里是超高壓運(yùn)作的,若流動(dòng)相中所含的空氣不除去,則流動(dòng)相通過色譜柱時(shí)其中的氣泡受到壓力而壓縮,流出柱子進(jìn)入檢測器時(shí)因常壓而將氣泡釋放出來,會造成檢測器噪聲增大,使基線不穩(wěn),最終導(dǎo)致儀器不能正常工作,特別是梯度洗脫時(shí)特別明顯。

? ? ? ? 如何最大程度地減少此類情況的發(fā)生呢?恒譜生建議您:

? ? ? ? 流動(dòng)相使用前一定要用過濾器過濾,這是最重要的!恒譜生溶劑入口過濾頭可有效濾除流動(dòng)相中的固體顆粒雜質(zhì);未經(jīng)過濾的溶劑或溶劑瓶中生長的微生物都會降低溶劑入口過濾頭的壽命和泵的性能,因此,需要定期清洗或更換溶劑入口濾頭。溶劑入口過濾頭由高品質(zhì)316L不銹鋼制成,耐腐蝕,適用于大部分溶劑。濾頭頂端階梯式連接出口可分別于1.5mm,2.2mm,3.5mm內(nèi)徑的管路連接??钍叫吞柖喾N,可供選擇。

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? ? ? ? 使用前新鮮準(zhǔn)備流動(dòng)相。最好每次分析前新調(diào)配流動(dòng)相,不要讓流動(dòng)相過夜或者長時(shí)間存放。這樣很容易滋養(yǎng)微生物等。

? ? ? ? 在色譜柱前添加使用保護(hù)柱進(jìn)行過濾,避免色譜柱堵塞。恒譜生液相色譜保護(hù)柱能將那些強(qiáng)保留的、不可吸附的化合物截留下來。樣品和流動(dòng)相的過濾可以維護(hù)保護(hù)柱對化學(xué)污染物的吸附容量,能夠更長時(shí)間的維護(hù)柱效,保護(hù)色譜柱免受污染物的危害,在額定背壓值內(nèi)和在高流速中仍保持穩(wěn)定、無滲漏。

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新聞底欄


發(fā)布于: 2021-03-26
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