? ? ? ? 高效液相色譜柱基于單分散硅膠微球，采用先進(jìn)的表面鍵合和修飾技術(shù)，經(jīng)優(yōu)化的裝填工藝而成。獨(dú)特的封端工藝使硅羥基活性降到最低，適用于分離具有不同疏水性的化合物。下面小編說說高效液相色譜柱選擇原則。
? ? ? ? 高效液相色譜柱選擇之一看物理性質(zhì)。例如看柱長，內(nèi)徑，粒徑，孔徑，顆粒形狀等參數(shù)有沒有符合自己要求。
? ? ? ? 高效液相色譜柱選擇之二看化學(xué)性質(zhì)。硅膠基質(zhì)：最通用的基質(zhì)，強(qiáng)度大，化學(xué)修飾容易，但使用的pH值范圍有限(一般為2—8，特殊修飾的可以達(dá)到1—12)。聚合物基質(zhì)：多為聚苯乙烯—二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂，化學(xué)穩(wěn)定，應(yīng)用pH范圍寬，具有更強(qiáng)的疏水性，對蛋白質(zhì)等樣品分離效果較好；但強(qiáng)度較小，有機(jī)溶劑可能導(dǎo)致聚合物溶脹而受損，批次重復(fù)性較差，商品化色譜柱不多，一般價(jià)格較貴。載碳量：基質(zhì)表面鍵合相的比例，載碳量高，則保留增加，適合分析非極性化合物。鍵合相：鍵合試劑不同，對化合物的選擇性不同，一般長鏈的烷基鍵合相(C18 、C8)比短鏈的(C4、 C3)穩(wěn)定；非極性的鍵合相比極性的鍵合相(-NH2)穩(wěn)定。封端：用短鏈將裸露的硅羥基鍵合后封閉起來，以減少殘留的硅醇基，減輕待測組分與酸性硅羥基反應(yīng)而引起的色譜峰拖尾現(xiàn)象。尤其對于極性樣品而言，未封端處理的色譜柱分離效果較差。
? ? ? ? 高效液相色譜柱選擇之三根據(jù)柱長及內(nèi)徑選擇。長度的選擇：柱越長，總柱效越高(n值越大)，柱越長，分析時(shí)間也越長。實(shí)驗(yàn)室一半以上的工作采用250—300mm，這也是普遍柱長。
? ? ? ? 最后總結(jié)高效液相色譜柱選擇：目前市場上主要以反相色譜為主，約占80%的比例。分析大分子量化合物選擇大孔徑色譜柱；對于高pH值或者堿性化合物需要選擇高封端或者特殊封端的色譜柱，以改善峰形，延長色譜柱使用壽命等。更多有關(guān)液相色譜柱請看http://fengdachuanmei.com/
發(fā)布于: 2023-01-30