??????? 近年來(lái)，為減少分析時(shí)間和提高分析通量而誕生的超高效液相色譜技術(shù)取得了令人矚目的發(fā)展。超高效液相色譜儀器能夠承受更高系統(tǒng)壓力和流速，并且分析速度和效率大大提升；檢測(cè)器模塊的改進(jìn)和新的數(shù)據(jù)處理算法也有效提升信號(hào)采集的速率；現(xiàn)代色譜柱技術(shù)的發(fā)展，即使是很短的柱長(zhǎng)也能提供足夠高效色譜分離效率，比如恒譜生液相色譜柱有30、50、75、100、150、200、250和300mm等多種長(zhǎng)度。高效的分離技術(shù)歸功于液相硅膠色譜填料，通過(guò)恒譜生的先進(jìn)的技術(shù)處理，金屬含量極低的99.9%超高純度球型多孔硅膠在孔徑、孔體積、比表面積、碳含量、金屬離子含量、峰型對(duì)稱度等都有統(tǒng)一管理和質(zhì)量保障。
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??????? 對(duì)液相色譜技術(shù)的研究有許多方向，其中提高通量是能夠提升液相色譜分析速率的重要研究方向。在標(biāo)準(zhǔn)儀器操作模式下，自動(dòng)進(jìn)樣器序列發(fā)生在每次進(jìn)樣之前。該順序通常包括將針頭移至指定的樣品瓶位置、取樣、移回進(jìn)樣器閥以及一系列針頭清洗以減少樣品殘留。這種方法有很多限制和操作步驟，可能會(huì)增加儀器循環(huán)時(shí)間，從而降低整體分析通量。
??????? 這里介紹一下多次進(jìn)樣技術(shù)，同步進(jìn)樣循環(huán)樣品制備的一個(gè)變化是單次實(shí)驗(yàn)運(yùn)行中的多次進(jìn)樣 (MISER) 技術(shù)。在 MISER 中，多次進(jìn)樣以與上述相同的方式運(yùn)行，但數(shù)據(jù)不是作為單獨(dú)的色譜圖收集的，而是收集在單個(gè)數(shù)據(jù)文件中。這是定性工作的理想策略，其中進(jìn)樣序列中的一系列運(yùn)行的快速比較可以快速識(shí)別樣品組中的一般趨勢(shì)和異常值（即高豐度和低豐度峰）。
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??????? MISER 的主要缺點(diǎn)是和每個(gè)獨(dú)特的運(yùn)行收集單獨(dú)的色譜圖相比，峰量化的難度增加。許多用于定量的軟件算法使用特定保留時(shí)間（和/或 m/z 值，取決于檢測(cè)模式）下分析物峰和內(nèi)標(biāo)峰之間的面積比較，當(dāng)多個(gè)單獨(dú)的分離全部完成時(shí)，這可能更難合并繪制在單個(gè)色譜圖上。雖然它仍然可以通過(guò)液相色譜圖拆分程序或手動(dòng)處理來(lái)完成，但這些策略需要更多的用戶交互以確保所有峰都正確匹配。
??????? 隨著高通量篩選實(shí)驗(yàn)中運(yùn)行次數(shù)的增加，整體工作量顯著增加。因此，重要的是要考慮正在進(jìn)行的高通量實(shí)驗(yàn)的總體目的，更具體地說(shuō)，它們是定性的還是定量的，以確定哪種方法最適合減少循環(huán)時(shí)間。
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發(fā)布于: 2021-12-31